اندازه گیری فسفرگیاه به روش اسپکتروفتومتری

مقدمه:

برای اندازه گیری عنصرمعدنی فسفردرگیاه به روش خاکستر به دو صورت می توان عملکرد که عبارتند از:

1. خاکستر تر یا wet Ash
    به این صورت است که  مقداری از گیاه پودر شده را وزن میکنیم و داخل محلول HCLO4   یاHNO3 ریخته و در دمای 110 درجه سانتی گراد در طول شب قرار میدهیم
   اسید نیتریک دیواره  و غشا و ترکیبات آلی را هضم می کند و باعث می شود  که عنصر داخل آن آزاد شود،و قابل اندازه گیری می شود.
2. خاکستر خشک یا Dry Ash
   این روش به ان صورت است که وزن مشخصی از گیاه پودر شده را  به مدت 6ساعت در دمای 550درجه سانتی گراد داخل انکوباتور قرار میدهیم تا عناصر به فرم اکسید تبدیل شوند و بعد بااستفاده از معرف های خاصی که در شرح آزمایش آمده است مقدار عناصر را محاسبه خواهیم کرد.

موادووسایلموردنیاز

اسفناج ، هاون، لوله آزمایش، اسیدنیتریک ، بالون ژوژه ،کروزه،  قیف کاغذ،  صافی،  آمونیاک ، تورنسول ومحلول های
1.بلانک( معرف مولیبدات وانادات+ آب)
2.محلول های 100ppm   از p2o5  زیرا فسفر در خاکستر به همین شکل وجود دارد.

3.تهیه محلول های استاندارد از محلول p2o5 با غلظت های 10تا  ppm 50

(به این شکل که مثلا برای محلول با غلظت   10  ppm ؛ 10میلی لیتر آب را با90میلی لیتر محلولp2o5مخلوط می کنیم و بقیه غلظت ها هم با رعایت نسب تهیه می شوند)

شرح آزمایش

در روش اسپکتروفتومتری با توجه به  اینکه فسفر با معرفی به نام مولیبدات وانادات تشکیل کمپلکس زرد رنگ می دهد،می توانیم در طول موج450نانومتر جذب را بخوانیم.

به روش تخریب بافت گیاهی که ساده ترین و ابتدایی ترین روش عصاره گیری استعصاره برگ گیاه اسفناج را تهیه کردیم.
به این شکل که 20گرم برگه اسفناج  را به مدت 2 روز در دمای 70درجه در انکوباتور قرار دادیم و بعد از خشک شدن پودر کردیم.

حال 1 گرم از پودر داخل کروزه ریختیم و سپس چند قطره آب به آن اضافه کردیم و 2 میلی لیتر اسیدنیتریک که به نسبت 1 به 2 با آب مخلوط شده است روی خاکستر می ریزیم و به کمک یک میله شیشه ای آن را کاملاهم زیم تا خوب مخلوط شود و در آن کاملا حل شود بهد به کمک یک قیف و یک کاغذ صافی محلول را صاف می کنیم،سپس به کمک آمونیاک و کاغذ تورنسول محلول داخل بالون را  خنثی می کنیم تا به ph=7 یا کاغذ سبز رنگ شود.
بعد از اینکه محلول را خنثی کردیم 5/2میلی لیتر اسیدنیتریک 1به2 به آن اضافه کردیم و همچنین 5/7گرم هم از معرف مولیبدن به آن اضافه کردیمو آن را با آب مقطر به حجم 100میلی لیتر می رساندیم.
بعد از 10دقیقه جذب آن را توسط دستگاه اسپکتروفتومتری میخوانیم.

با این شکل که  ابتدا طول موج دستگاه را روی 450نانومتر تنظیم می کنیم،سپس با محلول بلانک صفر می کنیم و بعد طول موج های محلول استاندارد را غلظت های 20تا 40ppm  را خواندیم و سپس جذب محلول مجهول را که برابر 103/ شد ،خواندیم!

نتیجه آزمایش:
جذب های خوانده شده برای محلول های
1. استاندارد با غلظت 10ppm← 005/ نانومتر
2. استاندارد با غلظت 30ppm←011/ نانومتر

3. استاندارد با غلظت 40ppm←  054/ نانومتر

4. محلول مجهول                 ← 054/ نانومتر